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제 목 : 효소면역측정법 (Enzymed –linked immunosorbent assay, ELISA)을 이용한 단백질 분석
작성자 관리자 등록일 2021년 05월 10일 17시 42분
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. 기술 정보

기술명

효소면역측정법 (Enzymed linked immunosorbent assay, ELISA)을 이용한 단백질 분석

목적

세포나 조직, 혈액등에서 발현하는 특정 단백질을 분석하는 시험

담당팀

세포생리팀

작성자

김해정

 

. 기술내용

기술

내용

Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)란 항체에 결합된 효소를 통해 항원-항체 반응을 확인하는 실험법으로, 항체 (antibody) 혹은 항원 (antigen)을 정성 및 정량하는 데에 주로 사용됩니다.

실험방법이 간단하고 정확할 뿐만 아니라 많은 샘플을 한번에 분석할 수 있다는 장점 때문에, 단백질 연구 시 가장 많이 사용되는 실험이기도 합니다.

실험

방법

1. Direct ELISA

- Antigencoated-plate에 부착시킨 후, antigenconjugated antibody를 직접 결합시켜 signal을 측정하는 방식입니다.

 

2. Indirect ELISA

- Primary antibody를 항원와 결합시킨 후 primary antibody를 항원으로 하는 conjugated secondary antibody를 부착시켜 signal을 확인하게 됩니다.

 

3. Sandwich ELISA

- 이 방법은 같은 antigen의 다른 epitope을 타겟으로 하는 두 가지의 antibody가 사용됩니다.

- 1antibody로 사용되는 capturing antibody를 먼저 plate에 코팅시킨 뒤, 샘플을 넣고 incubation하여 antigencapturing antibody와 결합시킵니다.

- 잔여 antigen들은 washing과정에서 모두 제거되며, 결합된 antigen위에 detecting antibody를 결합시키는 방식입니다.